ビュー: 621 著者: サイト編集者 公開時刻: 2026-07-07 起源: サイト
メタ タイトル: 眼科用ヒアルロン酸の無菌要件
メタ説明: 眼科用ヒアルロン酸の無菌性は、バイオバーデン、SAL、エンドトキシンの 3 つのテストを意味します。 HA に無菌処理が必要な理由と、それを適切に監査する方法を学びます。
キーワード: 無菌要件点眼用ヒアルロン酸、無菌ヒアルロン酸ナトリウム点眼薬、SAL 10^-6 点眼、無菌処理 HA、ガンマ線照射ヒアルロン酸分子量、バイオバーデン USP 61 62、USP 71 無菌試験、EP 2.6.1
眼科用ヒアルロン酸の購入者 3 人に、そのサプライヤーの製品が「滅菌」されているかどうか尋ねると、おそらく 3 つの異なる答えが得られるでしょう。 1 つは「無菌性: 合格」という COA を示しています。2 つ目は、バイオバーデン テストで特定のコロニー数を下回ったことを示しています。 3 番目は、エンドトキシンの結果が「<0.05 EU/mg.」であることを示しています。
3 つはすべて実際のテストです。どれも他の 2 つと交換可能ではありません。そして、私たちの経験では、購入者が眼科用ヒアルロン酸ナトリウムのサプライヤーを評価する際に犯す最も一般的な間違いは、顧客を混乱させることです。
この記事では、眼科用ヒアルロン酸にとって「無菌性」が実際に何を意味するのかを規制、製造、サプライヤーの各側面にわたって解き明かし、HA が単に発売規格品目だけでなく、無菌性の達成が真の工学的問題となる数少ない医薬品添加剤の 1 つである理由を説明します。
眼科用 HA 製品は 3 つの異なる微生物安全層の対象となり、それぞれの測定値が異なります。
層 |
測定内容 |
公定書の参考資料 |
「パス」の本当の意味 |
エンドトキシン |
細菌の細胞壁断片 (LPS)、細菌の生死を問わず |
USP <85>、EP 2.6.14、中国薬局方 |
臨床的に重大な発熱物質の負荷なし |
バイオバーデン (微生物の限界) |
非滅菌材料中の単位重量/体積あたりの生存微生物数 |
USP <61> TAMC、USP <62> TYMC および不快な微生物 |
定義された閾値を下回る微生物量 |
無菌性 |
生存可能な微生物が存在し ないこと を確率で表す |
USP <71>、EP 2.6.1、JP 4.06 |
10⁶ ユニットあたり≤1 生存微生物 (SAL 10⁻⁶) |
レイヤーは階層構造になっています。材料のバイオバーデンスは許容限界を大幅に下回っていても、無菌性を満たしていない場合があります。材料はスポットテストで無菌性を満たしていても、エンドトキシンが眼科限界を超えて残留することがあります。これは、エンドトキシンは分子であり生物ではなく、エンドトキシンを生成する細菌の滅菌にも生き残るためです。
眼科HAにおけるエンドトキシン制御に関する以前のガイドでは、エンドトキシンについて詳しく説明しました。この記事では、他の 2 つの層、つまり無菌性の保証と微生物の制限に焦点を当て、それらが原材料のサプライ チェーンにとって何を意味するかに焦点を当てます。
目は医薬品製造において最も過酷な投与経路の 1 つです。経口または静脈内経路とは異なり、免疫クリアランス能力には限界があります。角膜と前房には血管リンパ系がないため、生存可能な微生物が眼表面または前房内に定着すると、局所防御は主に細胞自律的になります。
臨床結果は理論的なものではありません。
·眼内手術後の 眼内炎が グラム陰性菌によって引き起こされる場合、歴史的には、たとえ迅速な治療を行ったとしても、かなりの割合の症例で視覚的転帰が 20/200 よりも悪化しました。
· 微生物性角膜炎は、依然として世界的に予防可能な角膜失明の主な原因となっています。 汚染されたコンタクトレンズ溶液または点眼薬に関連する
・ 有毒前眼部症候群（TASS）は生存微生物ではなくエンドトキシンによって引き起こされますが、今でも眼科手術の安全警告に定期的に表示され、 前の記事で指摘されているように、 両方を制御する必要があることを強調しています。 生存微生物と非生存発熱物質の
規制当局は、すべての眼科用製剤（点眼薬、軟膏、眼内粘弾性物質、眼内洗浄剤、IOLコーティング、無菌使用を目的としたコンタクトレンズ溶液）を、投与時点で無菌でなければならない製品として分類することで対応し、さらに、複数回投与形式の場合は、通常は防腐剤系による開封後の汚染に耐える必要がある。
必要な無菌保証レベル (SAL) は、すべての眼科用 HA 製品にわたって一律の数値ではありません。適用の侵襲性と投与回数に応じて調整されます。
応用 |
一般的な HA フォーマット |
必要なSAL |
規制のアンカー |
防腐剤フリーの単位用量点眼薬（使い切りアンプル） |
0.1 ～ 0.4 % HA、約 0.3 mL バイアル |
1ユニットあたり10⁻⁶ |
USP <71>、EU GMP Annex 1、ターミナル用 ISO 11137 |
複数回投与の保存型点眼薬 |
0.1 ～ 0.3 % HA、5 ～ 10 mL ボトル |
充填時 1 容器あたり 10⁻⁶、防腐剤有効性試験 (PET/USP <51>) |
USP <51>、Ph. Eur. 5.1.3 |
眼科用粘手術装置（OVD、白内障手術） |
シリンジ内の 1 ～ 3 % HMW HA |
デバイスあたり 10⁻⁶さらにエンドトキシン ≤0.5 EU/mL (ISO 15798 準拠) |
ISO 15798、FDA OVD ガイダンス |
IOLコーティング、眼内HAリンス |
滅菌HA溶液 |
デバイスあたり 10⁻⁶、エンドトキシン ≤0.2 EU/デバイス |
FDA 眼内装置ガイダンス |
コンタクトレンズ溶液（滅菌フォーマット） |
HAベース、複数回投与 |
充填 + PET で 10⁻⁶ |
ISO 14729、Ph.Eur. 5.1.3 |
この表から 2 つのことに注目してください。
まず、（保存された複数回投与用の容器を介さずに）目に直接到達するすべての眼科用 HA 製品の SAL 目標は 10⁻⁶であり 、これは静脈内薬や植込み型医療機器に適用されるのと同じ基準です。目は調節器によってあたかも無菌区画であるかのように扱われます。
第 2 に、エンドトキシン制限は 上に重ねられるものであり、置き換えるものではありません。 無菌基準の製品は無菌性を通過しても、エンドトキシンに合格しない可能性があります。両方を証明する必要があります。
ここで、ヒアルロン酸が医薬品賦形剤として真に珍しいものになります。ほとんどの小分子 API および多くの生物製剤では、包装された最終製品の最終滅菌が推奨されるアプローチです。これにより、最高の滅菌保証が提供され、物理的線量によって監査可能であり、滅菌後の再汚染リスクが最小限に抑えられます。
眼科用に使用されるヒアルロン酸ナトリウムの場合、ほぼすべての最終滅菌方法に問題があります。
γ線は、多くの医療機器や医薬品粉末の最終滅菌のゴールドスタンダード方法です。しかし、HA の場合、それは分子量のメスです。
γ線照射されたHAに関する公表データは一貫して、酸化的鎖切断による用量依存性の不可逆的な分子量減少を示しています。
· ~20 kGy : HA 分子量は、高分子量範囲の開始点から約 230 kDa まで低下します (PMC6680453)。
· ~40 kGy : さらに~140 kDaまで低下します。
· ~60 kGy : ~60 kDa に低下します。レオロジーが 1.5 ～ 2.5 MDa の範囲に依存する OVD にとっては壊滅的な損失です。
· 多くの点眼用粉末に使用される低用量でも、粘度、pH、色が目に見えて変化し、不飽和結合の形成を示す新しい UV 吸収ピークが 265 nm 付近に現れます (Pubmed 26049989、Food Chem 2008)。
眼科用 HA は分子量に依存するレオロジー (OVD の粘弾性、点眼薬の保持時間)特に基づいて選択されるため に 、完成した HA 製品のγ 滅菌は、ほとんどの眼科用グレードではオプションではありません。
EO 滅菌では鎖の切断は回避されますが、残留エチレンオキシドとエチレン クロロヒドリンが発生します。これらは、徹底的な脱気と検証が必要な有毒残留物です。 EO はまた、HA に測定可能な分解を引き起こし、さらに重要なことに、眼への接触に対する厳しい制限を満たさなければならない残留プロファイルを残します。最近のホワイトペーパー (Sterigenics、眼科用 API) では、いくつかの眼科用 API について EO の実現可能性が実証されていますが、HA はその中には含まれていません。
一般的なオートクレーブ サイクル (121 °C で 15 分間) では、HA で加水分解鎖の切断が発生します。粘度が大幅に低下し、分子量分布が広がります。眼科用途はまさに、元の MW プロファイルが最も重要な用途です。
従来の乾熱脱パイロジェンでは、250 °C で 30 分以上の温度が必要です。 HA ポリマーはその温度よりかなり低い温度で分解します。
これは HA に損傷を与えない 1 つの方法ですが、粘度による制約を受けます。特定の粘度を超える高分子量 HA 溶液 (≥1.5 %) を、許容可能な処理量で滅菌グレードのフィルターに押し込むのは非常に困難です。まさにこれが、処方化学者が眼科用 HA 製品を設計する際に、分子量と濃度と濾過性のバランスをとらなければならない理由です (Runxin の眼科用グレードの概要に記載されているように)。
実際的な結論：ほとんどの眼科用 HA の無菌性は、最終製品の最終滅菌ではなく、無菌処理によって達成されます。
無菌処理とは、製品、一次包装、および充填環境が、制御された環境内でまとめられる前に、すべて個別に滅菌されることを意味します。
眼科用 HA の場合、これは通常次のようになります。
・無菌溶液から濾過することにより滅菌された バルク HA 粉末 、または MW に損傷を与えないことが証明されたその他の手段 (多くの場合、バイオバーデンは単純に非常に低く制御されているため、その後の配合と濾過で必要な保証が達成されます)。
・ 一次包装 （バイアル、ボトル、スポイトチップ、シリンジ）をオートクレーブ、乾熱、または 空の コンポーネントのγ線照射によって滅菌します。HA がまだ存在していないため、これらはすべて実行可能です。
· 充填および密封が実行されます。 で ISO 7 / グレード B のバックグラウンド内の ISO 5 / グレード A 環境EU GMP 付属書 1 (2022 年改訂、完全発効は 2023 年 8 月) に従って、
· 滅菌濾過します。 充填直前に最終溶液を 0.22 μm (またはそれ以下) のフィルターで
·バッチごとに コンテナの密閉性が 検証されます (真空度の低下、高電圧漏れの検出など)。
これは終末期の滅菌よりも大幅に費用がかかり、要求も厳しいものです。それには以下が必要です:
· 継続的な環境モニタリング（生存粒子および非生存粒子）を備えた検証済みのクリーンルーム。
· 無菌プロセスシミュレーション (培地充填) は 、TSB または同様の増殖培地を使用して、定義された頻度で実行され、無菌チェーンを検証するために充填ライン全体で処理されます。
· 無菌規律に従って訓練を受け、ガウンを着用し、監視される資格のあるオペレーター。
· 精製水、WFI、きれいな蒸気、圧縮ガスなど、すべての公共事業の厳格な認定。
附属書 1 の 2022 年改訂ではが新たに強調されました 、汚染管理戦略 (CCS) 。これは、無菌製造ライフサイクル全体にわたって微生物および粒子汚染を管理するための施設全体の文書化されたプログラムです。 CCS、培地充填結果、環境モニタリングの傾向を説明できないサプライヤーは、標準的な眼科用 HA の要件を満たしていません。
ここで、微妙ではありますが重要な点があります。滅菌試験 (USP <71>) は通常 最終製品に対して実行されます。 、原材料ではなくHA バルク粉末のような原材料は通常、 完全な無菌性ではなく、バイオバーデン (微生物の数え上げ) と特定の微生物について検査されます。
関連する公定試験は次のとおりです。
· USP <61> / EP 2.6.12 — 微生物計数試験 (好気性微生物の総数については TAMC、酵母およびカビの総数については TYMC)。
· USP <62> / EP 2.6.13 — 特定の微生物の検査 (例、経路と用量に応じて、 大腸菌、, サルモネラ菌 、黄色ブドウ 球菌、, 緑膿菌、胆汁耐性グラム陰性菌の非存在)。
眼科用グレードの HA の場合、一般的な許容基準は次のように厳しいです。
· TAMC: ≤10² CFU/g (一部のメーカーは眼科用グレードとして ≤10 CFU/g を設定しています)。
· TYMC: ≤10¹ CFU/g。
· 不快な微生物: 1 g (または製品に割り当てられた薬局方のカテゴリーに応じて 10 g) には含まれません。
これが最終製品メーカーにとって重要な理由: 原材料のバイオバーデンが、無菌プロセスで SAL 10⁻⁶ まで削減する必要がある開始微生物量を設定します。初期の微生物負荷が高いほど、滅菌濾過ステップの要求が高く、フィルターの寿命が短くなり、不完全な殺菌のリスクが高くなります。
実際には、これは次のことを意味します。
· 最終製品メーカーは、バイオバーデンの悪い HA 原料を受け入れることができず、それを補うために無菌プロセスに依存します。
· 購入者は、「滅菌: 合格」証明書だけでなく、各ロットのバイオバーデン データを要求する必要があります。粉末は されていません。 受け取った時点では滅菌
· 信頼できるサプライヤーは、上流の発酵衛生、クリーンルームでの取り扱い、梱包を通じてバイオバーデンを管理し、ロットレベルのデータを提供します。
2026 年の眼科用 HA の無菌性に関連する規制の全体像は、いくつかの調和された柱に基づいています。
· USP <71> 無菌試験 — EP 2.6.1 および JP 4.06 と調和。 最終製品の無菌性を検証する方法を規定します。最近の公定更新の時点でも、成長促進と適合性テストの要件は引き続き厳格に施行されています。
· USP <61> / <62> — 原材料の微生物の数え上げと特定の微生物。
· EU GMP Annex 1 (2022 年改訂版) — 2023 年 8 月から完全に発効。必須の CCS を含む、世界的に適用可能な滅菌製造の最も詳細な規格。
· FDA ガイダンス: 無菌処理によって製造された無菌医薬品 — 現在の適正製造基準 — 米国における附属書 1 の対応物。
· ISO 11137 (γ)、 ISO 11135 (EO)、 ISO 17665 (湿熱) — 最終滅菌方法。 HA については、主に一次包装滅菌に関連しており、製品自体には関連していません。
· NMPA — 中国の規制当局は、眼科用途向けの HA API について USP と EP の両方の試験方法を受け入れ、滅菌施設に対する附属書 1 の原則に関する期待を調整しています。
したがって、世界中の眼科製品の顧客にサービスを提供しようとするサプライヤーは、少なくとも 3 つの薬局方 (USP/EP/JP/NMPA) に準拠していることを実証し、眼科グレードのラインについて附属書 1 グレードの無菌製造環境を維持できる必要があります。
糸口をまとめると、真の無菌機能を備えたサプライヤーと、COA に「無菌」と書かれているが、眼科用の使用を裏付ける設備が整っていないサプライヤーを区別する質問がここにあります。
眼科用グレードの HA は、付録 1 に従い、グレード B のバックグラウンド内の ISO 5 / グレード A 環境で製造されていますか? 充填がグレード C 以下で行われた場合、眼科グレードの無菌性という主張は疑問視されるべきです。
原末はどのようにしてバイオバーデンを低く抑えられるのでしょうか?また、ロットレベルの TAMC/TYMC の結果はどのようなものですか? 最終製品の無菌性のみを報告し、原材料のバイオバーデンを報告しないサプライヤーは、全体像の半分を隠していることになります。
一次包装にはどのような滅菌方法が適用されますか? HA 自体はほとんどの場合、最終滅菌ではなく無菌充填されるため、包装滅菌がチェーンにおける唯一の最終滅菌ステップとなります。
最終的な点眼液の滅菌濾過仕様は何ですか?また、フィルターの完全性はどのように検証されますか? 文書化されたバブルポイントまたは拡散流テストを探してください。
メディアの充填はどのくらいの頻度で実行されますか? また、最新の結果はどのようなものでしたか? 付録 1 では、無菌ラインごとに少なくとも年に 2 回培地を充填することを推奨しています。最近の傾向は歴史的な完璧さよりも重要です。
汚染管理戦略はどのようなものですか?また、それは公共施設、人員、施設全体にわたってどのように維持されますか? CCS は 2023 年から附属書 1 に基づいて義務化されています。
サプライヤーは、自社の特定の製品マトリックス (USP <71> 適合性) に関する公定無菌試験の方法の検証 (静菌/真菌の実証を含む) を提供できますか? HA の粘度は、エンドトキシン試験と同様に、無菌試験を妨げる可能性があります (以前のエンドトキシンの記事を参照)。この方法は、一般的なスープではなく、特定の製品に対して機能することを証明する必要があります。
Shandong Runxin Biotechnology では、1998 年以来、医薬品グレードのヒアルロン酸ナトリウムを製造しています。当社の眼科グレードのラインは、米国 FDA に登録済みの DMF 036368 を備えた ISO 13485 および cGMP フレームワークに基づいて稼働しており、34 の輸出市場にわたる眼科製品の顧客に供給しています。当社の無菌製造環境、検証済みの培地充填プログラム、当社の特定のマトリックスに関する USP <71> / EP 2.6.1 の公定法による検証、およびロットレベルのバイオバーデン報告書は、監査の議論に利用できます。
私たちは、購入者が信頼に対して「無菌」の主張を受け入れることを期待していません。私たちは、お客様が上記の 7 つの質問をすることを期待しており、マーケティングではなくドキュメントでそのすべてに答える準備ができています。
ヒアルロン酸ナトリウムを眼科用途に指定または再認定していて、原材料レベルでの無菌性、微生物負荷、およびエンドトキシン管理に関する技術的な会話が必要な場合は、Runxin の眼科用原材料チームにお問い合わせください。
著者について。 この記事は、1998 年に設立された医薬品グレードのヒアルロン酸ナトリウムメーカーである Shandong Runxin Biotechnology Co., Ltd. の技術チームによって作成されました。 Runxin は、米国 FDA DMF 036368、ISO 13485 認証、COSMOS、HALAL、および cGMP アラインメントを取得しており、34 か国の眼科、整形外科、美容市場に HA を供給しています。
出典と参考資料
· USP <71> 無菌試験。 USP <61> 微生物計数試験。 USP <62> 特定の微生物の検査
· 欧州薬局方 2.6.1 無菌性、2.6.12 微生物列挙、2.6.13 特定微生物、2.6.14 細菌エンドトキシン
・日本薬局方4.06無菌試験
· EU GMP 付属書 1: 無菌医薬品の製造 (2022 年改訂、2023 年 8 月発効) — EMA リンク
· FDA ガイダンス: 無菌処理によって製造された無菌医薬品 — 現在の GMP
· ISO 11137 (γ)、ISO 11135 (EO)、ISO 17665 (湿熱)、ISO 15798 (OVD)
· ステリジェニクス ホワイトペーパー: 眼科用有効医薬品の選択に対するガンマ線およびエチレンオキサイド滅菌の効果 — リンク
· PMC6680453、 ガンマ線照射で調製された低分子量ヒアルロン酸は皮膚の創傷治癒を促進します — リンク
· Pubmed 26049989、 ガンマ線照射ヒアルロン酸の構造と抗酸化特性 (Food Chem、2008) — リンク
· PMC10236422、 病院または薬局環境における点眼薬の現地生産 — リンク
· HiMedia Labs、 USP <71> コンプライアンスの概要 (2026 年 1 月) — リンク
· Runxin の関連記事: 眼科 HA におけるエンドトキシン制御。眼科用グレードのヒアルロン酸ナトリウム — 購入者が知っておくべきこと
