Dilihat: 621 Penulis: Editor Situs Waktu Publikasi: 07-07-2026 Asal: Lokasi
Judul Meta: Persyaratan Sterilitas untuk Asam Hyaluronic Oftalmik
Deskripsi Meta: Kemandulan dalam asam hialuronat mata berarti tiga pengujian — beban biologis, SAL, dan endotoksin. Pelajari mengapa HA memerlukan pemrosesan aseptik dan cara mengauditnya dengan benar.
Kata kunci: persyaratan sterilitas asam hialuronat mata, tetes mata natrium hialuronat steril, mata SAL 10^-6, proses aseptik HA, iradiasi gamma berat molekul asam hialuronat, bioburden USP 61 62, uji sterilitas USP 71, EP 2.6.1
Tanyakan kepada tiga pembeli asam hialuronat tingkat mata apakah produk pemasok mereka 'steril' dan kemungkinan besar Anda akan mendapatkan tiga jawaban berbeda. Yang pertama mengacu pada COA yang menyatakan 'sterilitas: lulus.' Yang kedua mengacu pada uji beban biologis yang hasilnya berada di bawah jumlah koloni tertentu. Poin ketiga menunjukkan hasil endotoksin '<0,05 EU/mg.'
Ketiganya adalah ujian sesungguhnya. Tak satu pun dari keduanya dapat dipertukarkan dengan dua lainnya. Dan yang membingungkan mereka adalah, berdasarkan pengalaman kami, kesalahan paling umum yang dilakukan pembeli saat mereka mengevaluasi pemasok natrium hyaluronate untuk penggunaan mata.
Artikel ini menguraikan arti sebenarnya dari 'sterilitas' untuk asam hialuronat oftalmik di seluruh sisi regulasi, manufaktur, dan pemasok — dan menjelaskan mengapa HA adalah salah satu dari sedikit eksipien farmasi yang mencapai sterilitas adalah masalah teknis yang sebenarnya, bukan hanya item baris spesifikasi pelepasan.
Produk HA oftalmik memiliki tiga lapisan keamanan mikroba yang berbeda, masing-masing memiliki pengukuran yang berbeda:
Lapisan |
Apa yang diukurnya |
Referensi pelengkap |
Apa sebenarnya arti 'lulus'. |
Endotoksin |
Fragmen dinding sel bakteri (LPS), baik bakteri tersebut hidup atau mati |
USP <85>, EP 2.6.14, Farmakope Cina |
Tidak ada muatan pirogen yang signifikan secara klinis |
Bioburden (batas mikroba) |
Organisme yang dapat hidup per satuan berat/volume dalam bahan yang tidak steril |
USP <61> TAMC, USP <62> TYMC & organisme yang tidak menyenangkan |
Beban mikroba di bawah ambang batas yang ditentukan |
Kemandulan |
Tidak adanya mikroorganisme yang dapat hidup, dinyatakan sebagai suatu kemungkinan |
USP <71>, EP 2.6.1, JP 4.06 |
≤1 organisme hidup per 10⁶ unit (SAL 10⁻⁶) |
Lapisan-lapisannya bersifat hierarkis. Suatu bahan dapat mempunyai bioburden jauh di bawah batas penerimaan dan masih belum memenuhi sterilitas. Suatu bahan dapat memenuhi sterilitas pada uji spot namun membawa sisa endotoksin di atas batas oftalmik — karena endotoksin adalah sebuah molekul, bukan organisme hidup, dan ia bertahan dalam sterilisasi bakteri yang memproduksinya.
Kami membahas endotoksin secara mendalam dalam panduan kami sebelumnya tentang pengendalian endotoksin pada HA oftalmik. Artikel ini berfokus pada dua lapisan lainnya – jaminan sterilitas dan batasan mikroba – serta pengaruhnya terhadap rantai pasokan bahan mentah.
Mata adalah salah satu rute pemberian yang paling sulit dalam produksi farmasi. Tidak seperti rute oral atau intravena, obat ini memiliki kapasitas pembersihan kekebalan yang terbatas. Kornea dan bilik mata depan tidak memiliki sistem limfoid vaskular, sehingga ketika mikroorganisme hidup terbentuk di permukaan mata atau di dalam bilik mata depan, pertahanan lokal sebagian besar bersifat otonom sel.
Konsekuensi klinisnya tidak bersifat teoritis:
· Endophthalmitis setelah operasi intraokular, bila disebabkan oleh organisme Gram-negatif, secara historis memiliki hasil penglihatan yang lebih buruk dari 20/200 pada sebagian kecil kasus, bahkan dengan pengobatan yang tepat.
· Keratitis mikroba yang berhubungan dengan larutan lensa kontak atau obat tetes mata yang terkontaminasi masih menjadi penyebab utama kebutaan kornea yang dapat dicegah secara global.
· Toxic Anterior Segment Syndrome (TASS) – yang, seperti dicatat dalam artikel sebelumnya, didorong oleh endotoksin, bukan organisme yang dapat hidup – masih sering muncul dalam peringatan keselamatan bedah mata, menggarisbawahi bahwa mikroba yang dapat hidup dan pirogen yang tidak dapat hidup harus dikendalikan.
Regulator merespons dengan mengklasifikasikan seluruh sediaan mata (tetes mata, salep, viskoelastik intraokular, obat kumur intraokular, pelapis IOL, larutan lensa kontak yang ditujukan untuk penggunaan steril) sebagai produk yang harus steril pada saat pemberian, dan — untuk format multidosis — juga harus tahan terhadap kontaminasi pasca pembukaan, biasanya melalui sistem pengawet.
Tingkat jaminan sterilitas (SAL) yang disyaratkan bukanlah angka tetap di semua produk HA mata. Skala ini disesuaikan dengan tingkat invasi aplikasi dan jumlah dosis:
Aplikasi |
Format HA yang khas |
SAL yang diperlukan |
Jangkar peraturan |
Tetes mata dosis satuan bebas pengawet (ampul sekali pakai) |
0,1–0,4 % HA, ~0,3 mL botol |
10⁻⁶ per unit |
USP <71>, Lampiran 1 GMP UE, ISO 11137 untuk terminal |
Obat tetes mata pengawet multidosis |
0,1–0,3 % HA, botol 5–10 mL |
10⁻⁶ per wadah saat diisi, ditambah uji khasiat pengawet (PET/USP <51>) |
USP <51>, Ph.Eur. 5.1.3 |
Perangkat bedah viskos mata (OVD, operasi katarak) |
1–3% HMW HA dalam semprit |
10⁻⁶ per perangkat; endotoksin tambahan ≤0,5 EU/mL per ISO 15798 |
ISO 15798, panduan FDA OVD |
Pelapisan IOL, pembilasan HA intrakameral |
Larutan HA steril |
10⁻⁶ per perangkat, endotoksin ≤0,2 EU/perangkat |
Panduan perangkat intraokular FDA |
Solusi lensa kontak (format steril) |
Berbasis HA, multi-dosis |
10⁻⁶ pada pengisian + PET |
ISO 14729, Ph.Eur. 5.1.3 |
Ada dua hal yang perlu diperhatikan dari tabel ini.
Pertama , untuk setiap produk HA oftalmik yang mencapai mata secara langsung (tidak melalui wadah multidosis yang diawetkan), target SAL-nya adalah 10⁻⁶ — standar yang sama yang diterapkan pada obat-obatan intravena dan peralatan medis implan. Mata diperlakukan oleh regulator seolah-olah merupakan kompartemen steril.
Kedua , batasan endotoksin ditempatkan di atas standar sterilitas, bukan penggantinya. Suatu produk dapat melewati sterilitas dan masih gagal menghasilkan endotoksin. Keduanya harus dibuktikan.
Di sinilah asam hialuronat menjadi sangat tidak biasa sebagai eksipien farmasi. Untuk sebagian besar API bermolekul kecil dan banyak produk biologi, sterilisasi terminal pada produk jadi yang dikemas merupakan pendekatan yang lebih disukai — pendekatan ini menawarkan jaminan sterilitas tertinggi, dapat diaudit berdasarkan dosis fisik, dan meminimalkan risiko kontaminasi ulang setelah sterilisasi.
Untuk natrium hyaluronate yang ditujukan untuk penggunaan mata, hampir setiap metode sterilisasi terminal menimbulkan masalah.
Radiasi γ adalah metode sterilisasi terminal standar terbaik untuk banyak peralatan medis dan bubuk farmasi. Namun untuk HA, ini adalah pisau bedah dengan berat molekul.
Data yang dipublikasikan tentang HA yang diiradiasi γ secara konsisten menunjukkan penurunan berat molekul yang bergantung pada dosis dan tidak dapat diubah melalui pemotongan rantai oksidatif:
· ~20 kGy : Berat molekul HA turun menjadi sekitar 230 kDa dari titik awal pada kisaran MW tinggi (PMC6680453).
· ~40 kGy : turun hingga ~140 kDa.
· ~60 kGy : turun menjadi ~60 kDa — kerugian yang sangat besar untuk OVD yang reologinya bergantung pada kisaran 1,5–2,5 MDa.
· Bahkan pada dosis rendah yang digunakan untuk banyak bubuk mata, viskositas, pH, dan warna berubah secara signifikan, dan puncak penyerapan UV baru muncul sekitar 265 nm yang menunjukkan pembentukan ikatan tak jenuh (Pubmed 26049989, Food Chem 2008).
Karena HA oftalmik dipilih secara khusus karena reologinya yang bergantung pada berat molekul — viskoelastisitas dalam OVD, waktu retensi dalam obat tetes mata — γ-sterilisasi produk akhir HA, untuk sebagian besar kualitas oftalmik, bukanlah suatu pilihan.
Sterilisasi EO menghindari pemotongan rantai tetapi menimbulkan sisa etilen oksida dan etilen klorohidrin — residu beracun yang harus dihilangkan gasnya dan divalidasi secara ekstensif. EO juga menyebabkan degradasi HA yang terukur dan, yang lebih penting, meninggalkan profil residu yang harus memenuhi batas ketat untuk kontak mata. Whitepaper terbaru (Sterigenics, API oftalmik) menunjukkan kelayakan EO untuk beberapa API oftalmik, namun HA tidak termasuk di antaranya.
Siklus autoklaf yang umum (121 °C selama 15 menit) menyebabkan pemutusan rantai hidrolitik di HA. Viskositas turun secara signifikan, dan distribusi berat molekul melebar. Aplikasi mata adalah aplikasi yang paling mementingkan profil MW asli.
Depirogenasi panas kering klasik memerlukan suhu 250 °C selama ≥30 menit. Polimer HA terurai jauh di bawah suhu tersebut.
Ini adalah salah satu metode yang tidak merusak HA — namun dibatasi oleh viskositas. Larutan HA dengan MW tinggi (≥1,5 %) di atas viskositas tertentu sangat sulit untuk melewati filter tingkat sterilisasi pada hasil yang dapat diterima. Inilah sebabnya mengapa ahli kimia formulasi harus menyeimbangkan berat molekul dan konsentrasi dengan kemampuan menyaring ketika merancang produk HA oftalmik (seperti dicatat dalam ikhtisar tingkat oftalmik Runxin).
Kesimpulan praktisnya: untuk sebagian besar HA oftalmik, sterilitas dicapai melalui pemrosesan aseptik, bukan melalui sterilisasi terminal pada produk akhir.
Pemrosesan aseptik berarti produk, kemasan utama, dan lingkungan pengisian semuanya disterilkan secara terpisah sebelum disatukan dalam lingkungan yang terkendali.
Untuk HA oftalmik, biasanya terlihat seperti:
· Bubuk HA curah yang disterilkan dengan penyaringan dari larutan steril, atau dengan cara lain yang terbukti tidak merusak MW (seringkali, beban biologis dikontrol sedemikian rendah sehingga peracikan dan penyaringan berikutnya mencapai jaminan yang diperlukan).
· Kemasan primer (vial, botol, ujung penetes, jarum suntik) disterilkan dengan autoklaf, panas kering, atau iradiasi γ pada komponen kosong — semuanya dapat dilakukan karena HA belum ada.
· Pengisian dan penyegelan dilakukan di lingkungan ISO 5 / Grade A dalam latar belakang ISO 7 / Grade B , sesuai Lampiran 1 GMP UE (revisi 2022, berlaku sepenuhnya Agustus 2023).
· Mensterilkan filtrasi larutan akhir melalui filter 0,22 µm (atau lebih kecil) segera sebelum diisi.
· Integritas penutupan kontainer diverifikasi untuk setiap batch (misalnya peluruhan vakum, deteksi kebocoran tegangan tinggi).
Hal ini secara material lebih mahal dan lebih menuntut dibandingkan sterilisasi terminal. Itu membutuhkan:
· Kamar bersih yang tervalidasi dengan pemantauan lingkungan berkelanjutan (partikulat yang layak dan tidak dapat hidup).
· Simulasi proses aseptik (pengisian media) dijalankan pada frekuensi yang ditentukan, menggunakan TSB atau media pertumbuhan serupa, diproses melalui seluruh jalur pengisian untuk memvalidasi rantai aseptik.
· Operator yang berkualifikasi dilatih, mengenakan pakaian, dan dipantau dalam disiplin aseptik.
· Kualifikasi yang ketat untuk semua utilitas — air murni, WFI, uap bersih, gas bertekanan.
Revisi Lampiran 1 pada tahun 2022 memberikan penekanan baru pada Strategi Pengendalian Kontaminasi (CCS) – sebuah program terdokumentasi di seluruh fasilitas untuk mengelola kontaminasi mikroba dan partikulat di seluruh siklus hidup manufaktur steril. Pemasok yang tidak dapat memandu Anda melalui CCS mereka, hasil pengisian media, dan tren pemantauan lingkungan mereka tidak beroperasi sesuai standar yang disyaratkan HA oftalmik.
Berikut ini poin yang halus namun penting: pengujian sterilitas (USP <71>) biasanya dilakukan pada produk jadi , bukan pada bahan mentah. Bahan mentah seperti bubuk HA curah biasanya diuji untuk bioburden (pencacahan mikroba) dan mikroorganisme tertentu, bukan untuk sterilitas penuh.
Tes kompendial yang relevan adalah:
· USP <61> / EP 2.6.12 — Tes Pencacahan Mikroba (TAMC untuk jumlah total mikroba aerobik, TYMC untuk jumlah total ragi dan kapang).
· USP <62> / EP 2.6.13 — Tes untuk Mikroorganisme Tertentu (misalnya, tidak adanya Escherichia coli , Salmonella spp., Staphylococcus aureus , Pseudomonas aeruginosa , bakteri Gram-negatif toleran empedu, tergantung pada rute dan dosis).
Untuk HA tingkat oftalmik, kriteria penerimaannya sangat ketat:
· TAMC: ≤10² CFU/g (beberapa produsen menetapkan ≤10 CFU/g untuk tingkat oftalmik).
· TYMC: ≤10¹ CFU/g.
· Organisme yang tidak diinginkan: tidak ada dalam 1 g (atau 10 g, tergantung pada kategori farmakope yang ditetapkan pada produk).
Mengapa hal ini penting bagi produsen produk jadi: bioburden bahan mentah menetapkan beban mikroba awal yang harus dikurangi oleh proses aseptik hingga SAL 10⁻⁶. Semakin tinggi bioburden awal, semakin sulit langkah filtrasi sterilisasinya, semakin pendek masa pakai filter, dan semakin besar risiko kematian tidak sempurna.
Dalam praktiknya, ini berarti:
· Produsen produk jadi tidak dapat menerima bahan baku HA dengan bioburden yang buruk dan mengandalkan proses aseptik sebagai kompensasinya.
· Pembeli harus meminta data bioburden untuk setiap lot, bukan hanya sertifikat 'sterilitas: lulus' — bubuk tersebut tidak steril pada saat diterima.
· Pemasok yang kredibel mengendalikan bioburden melalui kebersihan fermentasi hulu, penanganan ruang bersih, dan pengemasan, serta menyediakan data tingkat lot.
Gambaran peraturan yang relevan dengan sterilitas HA mata pada tahun 2026 bertumpu pada beberapa pilar yang selaras:
· USP <71> Uji Sterilitas — diselaraskan dengan EP 2.6.1 dan JP 4.06; mengatur bagaimana sterilitas produk jadi diverifikasi. Pada pembaruan ringkasan terkini, persyaratan promosi pertumbuhan dan pengujian kesesuaian tetap diterapkan dengan ketat.
· USP <61> / <62> — enumerasi mikroba dan organisme tertentu untuk bahan mentah.
· Lampiran 1 GMP UE (revisi 2022) — berlaku penuh sejak Agustus 2023; standar terinci yang berlaku secara global untuk manufaktur steril, termasuk CCS wajib.
· Panduan FDA: Produk Obat Steril yang Diproduksi dengan Pemrosesan Aseptik — Praktik Manufaktur yang Baik Saat Ini — mitra AS pada Lampiran 1.
· ISO 11137 (γ), ISO 11135 (EO), ISO 17665 (panas lembab) — metode sterilisasi terminal; untuk HA, terutama berkaitan dengan sterilisasi kemasan primer, bukan pada produk itu sendiri.
· NMPA — Regulator Tiongkok menerima metode pengujian USP dan EP untuk HA API yang ditujukan untuk penggunaan mata dan telah menyelaraskan harapannya terhadap prinsip-prinsip Annex 1 untuk fasilitas steril.
Oleh karena itu, pemasok yang ingin melayani pelanggan oftalmik global harus mampu menunjukkan kepatuhan pada setidaknya tiga farmakope (USP/EP/JP/NMPA) dan mempertahankan lingkungan manufaktur steril tingkat Annex 1 untuk lini produk mata.
Secara keseluruhan, berikut adalah pertanyaan-pertanyaan yang membedakan pemasok dengan kemampuan aseptik asli dari pemasok yang COA-nya menyatakan 'steril' namun fasilitasnya tidak dirancang untuk mendukung klaim penggunaan obat mata.
Apakah HA tingkat oftalmik diproduksi di lingkungan ISO 5 / Tingkat A dengan latar belakang Tingkat B, sesuai Lampiran 1? Jika pengisian dilakukan pada tingkat C atau lebih buruk, klaim sterilitas tingkat oftalmik harus dipertanyakan.
Bagaimana bubuk curah tersebut dibawa ke bioburden rendah, dan apa hasil TAMC/TYMC di tingkat lot? Pemasok yang hanya melaporkan sterilitas produk akhir dan bukan bioburden bahan mentah menyembunyikan setengah dari gambaran tersebut.
Metode sterilisasi apa yang diterapkan pada kemasan utama? Karena HA sendiri hampir selalu diisi secara aseptik daripada disterilkan secara terminal, sterilisasi kemasan adalah satu-satunya langkah sterilisasi terminal dalam rantai tersebut.
Apa spesifikasi filtrasi sterilisasi untuk larutan mata akhir, dan bagaimana integritas filter diverifikasi? Carilah pengujian titik gelembung atau aliran difusif yang terdokumentasi.
Seberapa sering pengisian media dilakukan, dan apa hasil terbarunya? Lampiran 1 merekomendasikan pengisian media setidaknya dua kali setahun per jalur aseptik; tren terkini lebih penting daripada kesempurnaan sejarah.
Seperti apa Strategi Pengendalian Kontaminasi, dan bagaimana cara mempertahankannya di seluruh utilitas, personel, dan lokasi? CCS telah diwajibkan berdasarkan Lampiran 1 sejak tahun 2023.
Dapatkah pemasok memberikan validasi metode untuk uji sterilitas kompendial pada matriks produk spesifik mereka (kesesuaian USP <71>), termasuk demonstrasi bakteriostasis/fungistasis? Viskositas HA dapat mengganggu pengujian sterilitas seperti halnya pengujian endotoksin (lihat artikel endotoksin kami sebelumnya); metode tersebut harus terbukti berhasil untuk produk tertentu, bukan untuk kaldu generik.
Di Shandong Runxin Biotechnology, kami telah memproduksi natrium hyaluronate tingkat farmasi sejak tahun 1998. Produk tingkat mata kami beroperasi berdasarkan kerangka kerja ISO 13485 dan cGMP, dengan DMF 036368 terdaftar yang tercatat di FDA AS dan dipasok ke pelanggan mata di 34 pasar ekspor. Lingkungan manufaktur kami yang steril, program pengisian media yang tervalidasi, validasi metode ringkasan untuk USP <71> / EP 2.6.1 pada matriks spesifik kami, dan pelaporan bioburden tingkat lot tersedia untuk diskusi audit.
Kami tidak mengharapkan pembeli untuk mengambil klaim kepercayaan yang 'steril'. Kami mengharapkan mereka menanyakan tujuh pertanyaan di atas, dan kami siap menjawab semuanya — dengan dokumentasi, bukan dengan pemasaran.
Jika Anda menentukan atau mengkualifikasi ulang natrium hyaluronate untuk aplikasi oftalmik dan menginginkan percakapan teknis tentang sterilitas, beban biologis, dan pengendalian endotoksin pada tingkat bahan mentah, hubungi tim bahan baku oftalmik Runxin.
Tentang penulis. Artikel ini disiapkan oleh tim teknis di Shandong Runxin Biotechnology Co., Ltd., produsen natrium hialuronat tingkat farmasi yang didirikan pada tahun 1998. Runxin memegang sertifikasi DMF 036368 FDA AS, sertifikasi ISO 13485, penyelarasan COSMOS, HALAL, dan cGMP, serta memasok HA ke pasar mata, ortopedi, dan estetika di 34 negara.
Sumber & bacaan lebih lanjut
· USP <71> Uji Sterilitas; USP <61> Tes Pencacahan Mikroba; USP <62> Tes untuk Mikroorganisme Tertentu
· Farmakope Eropa 2.6.1 Sterilitas, 2.6.12 Pencacahan Mikroba, 2.6.13 Mikroorganisme Tertentu, 2.6.14 Endotoksin Bakteri
· Uji Sterilitas Farmakope Jepang 4.06
· Lampiran GMP UE 1: Industri Produk Obat Steril (revisi 2022, berlaku Agustus 2023) — Tautan EMA
· Panduan FDA: Produk Obat Steril yang Diproduksi dengan Pemrosesan Aseptik — GMP Saat Ini
· ISO 11137 (γ), ISO 11135 (EO), ISO 17665 (panas lembab), ISO 15798 (OVDs)
· Buku putih Sterigenik: Pengaruh Sterilisasi Gamma dan Etilen Oksida pada Pemilihan Produk Farmasi Aktif untuk Mata — link
· PMC6680453, Asam Hyaluronic dengan Berat Molekul Rendah yang Disiapkan dengan Iradiasi Gamma Meningkatkan Penyembuhan Luka Kulit — tautan
· Dipublikasikan 26049989, Sifat struktural dan antioksidan asam hialuronat iradiasi gamma (Food Chem, 2008) — tautan
· PMC10236422, Produksi obat tetes mata lokal di rumah sakit atau apotek — tautan
· HiMedia Labs, USP <71> Ikhtisar Kepatuhan (Jan 2026) — tautan
· Artikel Runxin terkait: Kontrol Endotoksin pada Ophthalmic HA; Sodium Hyaluronate Tingkat Mata — Yang Harus Diketahui Pembeli
